
Кои са LYME Diagnostics?
Lyme Diagnostics Ltd. са унгарска фирма, фокусирана върху по-точната рутинна диагностика на лаймската болест. Повече можете да прочетете на сайта им www.lymediagnostics.com или www.facebook.com/lymediagnostics

Доктор Béla Pál Bózsik MD работи с помощта на класическа микроскопия в тъмно поле и осъзнава, че има нужда от методи за разграничаване на спирохетата от артефактите в препаратите. За тази цел той разработва реактив – DualDur. Кръвната проба на пациента трябва да бъде взета в тази течност. Този реактив прави останалите предмети твърди и неподвижни и няма изкуствени продукти, докато Борелиите са запазени и продължават да се движат нормално.
Реактивът и методът DualDur® са разработени въз основа на 30-годишен опит в изследване на спирохети и диагностика на Лаймска болест. Реактивът DualDur ще позволи на анализатора в лабораторията, анализиращ кръвни проби, да вижда само спирохетите, 1000 пъти концентрирани, живи и движещи се. Този факт е потвърден чрез имунофлуоресценция и PCR. Бяха проведени безброй изследвания с DualDur, като внимателно се наблюдават и записват клинични симптоми и се извършват 110 000 серологични теста за потвърждаване на диагнозата.
Предимства на теста DualDur®
Проблеми със съвременните диагностични методи за лаймска борелиоза:
- най-често използваният тест, серологичният, не е надежден, особено в ранния стадий на заболяването и след лечението;
- директните диагностични методи могат да се провалят поради ниския брой и бързото разлагане на борелия в пробата;
- култивирането и PCR имат нисък добив в проби, които могат лесно да бъдат получени (напр. кръв);
DualDur е среда за клетъчна технология и метод за подготовка, който:
- съхранява пробата от кръв или ликвор за 2-3 седмици, включително съдържащата се в нея борелия;
- концентрира Borrelia 1000 пъти;
- директно изследва концентрата;
- се основава на напълно различна концепция от другите методи;
Крехката природа на Борелия
Спирохетите са грамотрицателни, подвижни, спираловидни бактерии, с дължина от 3 до 500 микрона (1 m = 0,001 mm). Спирохетите са уникални с това, че имат вътреклетъчни камшичета (аксиални фибрили или аксиални нишки).
Спирохетата Borrelia Burgdorferi s.l., в по-широк смисъл е отговорна за лаймската болест. Borrelia Burgdorferi е много чувствителен патоген. Неговата предпочитана температура на околната среда е 35 ° C и изисква специална хранителна среда, различна от тази, използвана за култивиране на други бактерии.
Без реагент DualDur, разпадането на борелия започва почти веднага в прясна кръв.
Недостатъците на най-често използваните диагностични тестове, серология:
Използването на серологията при лаймска борелиоза е много обсъждано. Двустепенният метод за изследване ELISA и Western-blot не успява поради ниска чувствителност в няколко случая, особено при:
- ранният стадий на заболяването (вж. справка);
- ниско ендемични области (вж. справка);
- така наречената сероотрицателна лаймска болест, когато имунната реакция отсъства или закъснява;
- фалшиво положителни случаи, когато пациентът е имунизиран, от кръстосана реакция от спирохети или вирусни инфекции;
- Лупус (SLE) или други автоимунни заболявания;
Следователно, серологията може да бъде отличен инструмент за увеличаване на специфичността за пациент с известна инфекция, но не и скрининг инструмент за ранен стадий.
Естеството на DualDur®
Само няколко часа след ухапването от кърлеж, Борелия може да попадне в кръвния поток на гостоприемника и да започне да се разпространява. Въпреки това, дори в късните и тежки случаи на лаймска борелиоза, борелията може да присъства в кръвта в относително нисък брой. Понякога само няколко бактерии могат да бъдат открити в цял мл. кръв.
За да се изследват само спирохетите, средата и методът DualDur отделят бактериалното съдържание с ниско тегло в кръвта и ги концентрират поне 1000 пъти. Това се прави по безопасен начин, така че бактериите да не бъдат увредени и да показват нормални признаци на живот, те дори се размножават.
Заключения от спецификацията на теста
- Микроскопията DualDur® може да идентифицира инфекция с борелия с голяма сигурност (чувствителност 93%).
- Микроскопията DualDur може да разграничи видовете Borrelia от видовете Treponema визуално, с 88% специфичност.
- Комбинацията от метода DualDur с PCR директен анализ дава комбинирана чувствителност и специфичност от 100%.
- Методът DualDur може да постигне възможно най-ниското ниво на откриване чрез микроскоп (1 спирохета в 50 зрителни полета).
- Пълната спецификация на теста и информация за клиничните изпитвания можете да намерите във файла “Спецификации на тест DualDur“
Стабилност на пробите
Кръвните проби, съхранявани в DualDur, остават стабилни поне 172 часа при стайна температура, така че Borrelia могат да бъдат анализирани чрез PCR и микроскопия.
Възможно ли е да се пропусне наличието на спирохети в кръвта?
Въпрос към Lyme Diagnostics: Ако в кръвната проба няма спирохети на Borrelia, но въпреки това има спирохети в кръвта или тъканите на човека? Как е отчетена тази възможност?
Отговор: Този метод е много чувствителен, което идва от факта, че бактериите от 4 ml кръв се концентрират в една капка.
В ранните дни на откриването на болестта, някои изследователи решили, че няма достатъчно Borrelia в кръвта, за да бъдат открити. Факт е, че тези бактерии се различават по брой, те се размножават с нови поколения в цикли от 2-3 седмици. Цифрите стават много високи, толкова високи, че дори обикновен кръвен тест може да ги открие в определени моменти – по този начин причината за болестта е открита чрез микроскопия в тъмно поле.
Въпреки това, за да се намерят борелиите, когато броят им е най-малък, се изисква концентриране. В тези моменти изглежда сякаш те липсват в кръвта, но могат да бъдат открити чрез концентриране или култивиране.
Концентрацията на Borrelia в различни тъкани е измерена в няколко експеримента и досега редица публикации потвърждават факта, че този брой е далеч над нивото на откриване при изследването DualDur.
Ако в кръвта няма откриваемо количество бактерии, това означава, че пациентът е в излекувано състояние. В случай на настояща инфекция, нивото на бактериите се променя между няколко хиляди борелии на милион тъканни клетки, но понякога спадат и до няколкостотин. Но дори и най-ниското ниво все още е поне 100 пъти по-високо от нивото на откриване при методите за концентриране – комбинирано с микроскопия или PCR. В момента, DualDur е единственият клинично тестван и готов за лаборатория ин витро диагностичен метод (IVD), който работи на този принцип.
Зададохме нивата на изпитване чрез разделяне на неуспешни резултати от теста, положителни, отрицателни тестове и стойностите между двете. Десетки хиляди тестове потвърдиха, че положителните резултати съответстват на клиничните симптоми.
Така че, ако има Borrelia в тялото на някого, в количества, които причиняват симптоми, то е много вероятно да бъде открито от теста. Тези бактерии използват кръвта за разпространение в тялото по всяко време и дори в случай на силна имунна реакция може да бъде засечена борелията, атакувана от антитела.
Пояснение: текстът има чисто информативен характер. Нямам никакви платени отношения с LYME Diagnostics, не ми плащат за публикация, нито получавам пари за направени тестове. Свързах се с тях за допълнителна информация за теста, защото следя темата и знам колко е трудно да бъде диагностициран човек.
Към датата на публикуване на тази статия (14 май 2021), тестът все още не е наличен за широка употреба в Европа, защото не е започнато масовото производство. Във фейсбук групата “Лаймска болест България – Lyme disease Bulgaria” се организират еднократни масови тестове. Цената на един тест излиза около 110 евро, отделно се заплащат транспортните разходи по изпращане на тестовете и обработената кръв от и към Унгария.